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发酵产谷氨酸需要注意两大要素,一个是菌种,一个是发酵的控制环境因素。菌种一般都是购买的,所以不多说了,主要说影响发酵的外部因素,也就是我们可以调控的因素:
1.供氧浓度
供氧不足:积累大量的乳酸,使发酵液的pH值下降,不利于谷氨酸的产生,同时,葡萄糖转成了乳酸,降低了产物的提出率。
2、铵根离子浓度
它可以影响到发酵液的pH值和产物的形成,是合成谷氨酸的原料;
3、磷酸盐浓度
要适当,过量会促进EMP途径,打破EMP与TCA之间的平衡,积累丙酮酸,产生乳酸并积累Val;
4、发酵液中的碳氮比
发酵过程中,应正确控制碳氮比。一般在菌体生长期碳氮比应大一些(氮低),在产酸期,碳氮比应小些(氮高)。在碳源和氮源的比为3∶1时,谷氨酸棒状杆菌会大量合成谷氨酸,但当碳源和氮源的比为4∶1时,谷氨酸棒状杆菌只生长而不合成谷氨酸
5、生物素
生物素过量时菌体生长繁殖快,细胞膜致密使得细胞内的谷氨酸无法排出,发酵液中由菌种细胞排出的谷氨酸仅能占氨基酸总量的12%;生物素亚适量时,菌体代谢失调,细胞膜通透性增强,细胞内的谷氨酸能及时排出,有利于谷氨酸的积累。因此分不同阶段进行控制。
6、发酵温度
发酵前期应采取菌体生长最适温度,即30~32 ℃。发酵中、后期菌体生长基本停止, 为积累大量谷氨酸, 应适当提高发酵温度
7、发酵液pH
pH对细胞的生长和谷氨酸脱氢酶的活性有影响。一般保持在7.0-7.5
8、通风
通风的实质就是供氧并使菌体和培养基充分混合。谷氨酸产生菌为兼性好氧菌, 在有氧、无氧的条件下都能生长,只是其代谢产物不同。在谷氨酸发酵过程中,通风必须适度。
9、泡沫
谷氨酸发酵是好气性发酵, 因通风和搅拌产生泡沫是正常的, 但泡沫过多会带来一系列问题: (1) 泡沫形成泡盖时, 代谢产生的气体不能及时排出,妨碍菌体呼吸作用,影响菌体的正常代谢; (2) 泡沫过多, 发酵液会外溢,造成浪费和污染; (3) 泡沫过多,易冲上罐顶,造成染菌。
影响酒精发酵的因素,主要有:
一、温度。温度对酒精发酵中的酵母繁殖、杂菌污染、酒精分的挥发及发酵时间均有影响。酵母最适繁殖温度为28~30℃,最适发酵温度为30~33℃。
二、PH值。不同的PH值可以使酒精发酵的产物不同,酵母在微酸时产物是乙醇,而在PH8时则产生甘油。
三、发酵时间。一般说来,满足酒精达到高峰的发酵时间越短越好,待酒精达到高峰时即开始蒸馏。
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